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影響湖北電泳漆電泳工藝的因素有哪些?陰級電泳漆生產(chǎn)廠(chǎng)家從下面四個(gè)方面分析:
1.電滲
在電場(chǎng)中液體相對于固體固定相的相對運動(dòng)稱(chēng)為電滲。在載體電泳中,影響電泳漆電泳運動(dòng)的一個(gè)重要因素是電滲作用。常見(jiàn)的情況是丙種球蛋白從原點(diǎn)向負極移動(dòng),這是電滲引起的反向移位現象。電滲的原因是載體通常含有可電離基團。例如,濾紙含有羥基且帶負電。與濾紙接觸的水溶液帶正電荷,液體移動(dòng)到負極。由于電滲常常與電泳同時(shí)存在,帶電粒子的移動(dòng)距離很小,電泳效果也受到影響。如果電泳方向與電滲方向相反,則實(shí)際電泳距離等于電泳距離和電滲距離。瓊脂含有瓊脂果膠,其中含有較多的硫酸鹽。因此,在瓊脂電泳中,電滲作用非常明顯,許多球蛋白移向負極。當瓊脂糖用作凝膠電泳時(shí),電滲作用減弱。對于電滲引起的移動(dòng)距離,可在支架中心放置中性有色染料或有色葡聚糖點(diǎn),觀(guān)察電滲的方向和距離。
2.電泳介質(zhì)的PH值
對于蛋白質(zhì)、氨基酸和其他兩性電解質(zhì),pH值離等電點(diǎn)越遠,粒子攜帶的電荷越多,游泳速度越快,反之亦然。因此,在分離混合物時(shí),應選擇能夠擴大各種蛋白質(zhì)電荷差的pH值,以促進(jìn)各種蛋白質(zhì)的有效分離。為了確保電泳過(guò)程中溶液的pH值恒定,必須使用緩沖溶液。
3.電場(chǎng)強度
電場(chǎng)強度是指每厘米的電位降(電位差或電位梯度)。湖北電泳漆電場(chǎng)強度直接影響電泳速度。電場(chǎng)強度越高,帶電粒子移動(dòng)越快。根據實(shí)驗需要,電泳可分為兩種類(lèi)型:一種是高壓電泳,電壓500~1000V或更高。由于電壓高,電泳時(shí)間短(有些樣品需要幾分鐘),適合于分離低分子化合物,如氨基酸和無(wú)機離子,包括分離部分聚焦電泳和分離序列電泳。由于高壓和高熱產(chǎn)生,必須安裝冷卻裝置。否則,熱會(huì )導致蛋白質(zhì)和其他物質(zhì)變性而無(wú)法分離。離子強度的增加和虹吸現象(電泳槽中的液體被吸到載體上)會(huì )影響物質(zhì)的分離。另一種是大氣壓電泳,其產(chǎn)熱量低。在10~25℃的室溫下,蛋白質(zhì)樣品的分離不會(huì )受到破壞,無(wú)需冷卻裝置。一般來(lái)說(shuō),分離時(shí)間較長(cháng)。
4.緩沖溶液的離子強度
溶液的離子強度是指溶液中每個(gè)離子的摩爾濃度與離子價(jià)平方的乘積的1/2。帶電粒子的遷移率與離子強度的平方根成反比。在低離子強度時(shí),遷移率較快,但離子強度過(guò)低,緩沖液的緩沖容量較小,很難保持恒定的pH值。在高離子強度時(shí),遷移率較慢,但電泳帶比低離子強度時(shí)薄且窄。通常,溶液的離子強度在0.02和0.2之間。