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電泳漆工藝之電泳分離有哪些影響因素呢?接下來(lái)陰級電泳漆廠(chǎng)家為大家詳細介紹:電泳漆粒子在電場(chǎng)之中的移動(dòng)速度主要取決于其攜帶的凈電荷量,并受粒子形狀和大小的影響。此外,它還受到內部條件的影響,如電場(chǎng)強度、溶液pH值、離子強度、載體特性和溫度。
電場(chǎng)強度
電場(chǎng)強度是指每厘米距離的電壓降,也稱(chēng)為電位梯度或電位梯度。電場(chǎng)強度對粒子的游動(dòng)速度起著(zhù)非常重要的作用。電場(chǎng)強度越高,帶電粒子的游動(dòng)速度越快。根據電場(chǎng)強度的不同,電泳可分為高壓電泳和常壓電泳。常壓電泳的電場(chǎng)強度一般為2~10Vcm,電壓為100~500V,電泳時(shí)間從幾十分鐘到幾十小時(shí)不等。主要用于帶電大分子的分離;高壓電泳的電場(chǎng)強度為20~200Vcm,電壓大于500V,電泳時(shí)間為幾分鐘到幾小時(shí)。主要用于帶電小分子物質(zhì)的分離。
溶液的PH值
溶液的PH值決定了溶液之中粒子分子的離解程度,即粒子分子攜帶的凈電荷。對于兩性電解質(zhì),溶液的pH值不僅決定粒子分子攜帶的電荷類(lèi)型,而且還決定凈電荷量。溶液的pH值離等電點(diǎn)越遠,粒子攜帶的凈電荷越多,游動(dòng)速度越快;相反,粒子的游動(dòng)速度很慢。當溶液的pH值等于溶質(zhì)的等電點(diǎn)時(shí),其凈電荷為零,其游動(dòng)速度也等于零。因此,在電泳過(guò)程之中,溶液的pH值應選擇合適的值,并應使用緩沖液保持溶液的pH值恒定。
離子強度
溶液的離子強度越高,粒子在電場(chǎng)之中的游動(dòng)速度。
電滲
越慢,溶液相對于固體載體的相對運動(dòng)稱(chēng)為電滲。例如,在紙電泳之中,由于濾紙纖維素之上帶有一定量的負電荷,液體在電場(chǎng)之中相對于固體支撐介質(zhì)的相對運動(dòng)稱(chēng)為電滲。電泳載體表面可能存在一些帶電基團。例如,濾紙表面通常有一些羧基,瓊脂可能含有一些硫酸鹽基團,玻璃表面通常有Si-OH基團。電離之后,這些基團對載體表面充電,吸附一些帶相反電荷的離子,在電場(chǎng)作用之下向電極移動(dòng),在載體表面形成溶液流。在pH>3時(shí),玻璃表面帶負電,吸附溶液之中的正離子,使玻璃表面的溶液層帶正電,在電泳之中遷移到負極,并驅動(dòng)電極液體產(chǎn)生電滲流到負極。如果電滲方向與待分離分子的電泳方向相同,則電泳速度加快;相反,電泳速度降低了。
支撐介質(zhì)的篩分尺寸
支撐介質(zhì)的篩分尺寸對分離的生物大分子的電泳遷移率有顯著(zhù)影響。在具有大篩孔的介質(zhì)之中,游動(dòng)速度快,反之,游動(dòng)速度慢。
溫度
當電流在電泳過(guò)程之中通過(guò)支撐介質(zhì)時(shí),會(huì )產(chǎn)生熱量。根據焦耳定律,電流通過(guò)導體時(shí)產(chǎn)生的熱量與電流強度(I)、導體電阻(R)和通電時(shí)間(T)(Q=i2rt)的平方成正比。